Оборудование                                 Partec Foow Cytometry

Клеточный счетчик CCA

Клеточный счетчик CCA позволяет:

bulletПосчитывать количество клеток в мл
bulletПодсчитывать живые и мертвые клетки 
bulletСтроить гистограмму ДНК
bulletАнализировать клеточный цикл
bulletОпределять плоидность
bulletОпределять размер клеток

 

Принцип измерения

Процедура подготовки костного мозга и крови к измерению

Принцип измерения основан на специфической флюоресценции  клеточных меток. CCA определяет  флюоресцирующие клетки и подсчитывает их. 

При прохождении клеточной взвеси через проточную кювету  объемом 250 мкм. Прибор регистрирует каждую клетку, испускающую возбужденный свет.

bulletвыделите мононуклеарные клетки в градиенте плотности
bulletотмойте клетки фосфатным буфером (PBS)
bulletдобавьте 1 мл раствора А CyStain UV и инкубируйте 5 минут при комнатной температуре
bulletПрофильтруйте клеточную суспензию через фильтр с порами 50 мкм CellTrics® непосредственно в пробирку для измерения.
bulletдобавьте 3 мл раствора В CyStain UV и инкубируйте 5 минут при комнатной температуре
bulletпроведите анализ с помощью клеточного счетчика CCA

Процедура подготовки клеток опухоли к измерения (свежей или замороженной)

 Процедура подготовки культуральных  клеток

bulletвырежте кусочек опухоли скальпелем и пометите в 1 мл раствора А CyStain UV
bullet инкубируйте  5 минут, посмтоянно встряхивая, при комнатной температуре
bullet Профильруйте 0.5 мл клеточной суспензии  через фильтр с порами 50 мкм CellTrics® непосредственно в пробирку для измерения
bullet добавьте 3 мл раствора В CyStain UV и инкубируйте 5 минут при комнатной температуре
bullet проведите анализ с помощью клеточного счетчика CCA
bullet Вырастите клетки
bulletотмойте клетки фосфатным буфером (PBS)
bulletдобавьте 1 мл раствора А CyStain UV и инкубируйте 5 минут при комнатной температуре
bulletПрофильтруйте клеточную суспензию через фильтр с порами 50 мкм CellTrics® непосредственно в пробирку для измерения.
bulletдобавьте 3 мл раствора В CyStain UV и инкубируйте 5 минут при комнатной температуре
bulletпроведите анализ с помощью клеточного счетчика CCA

Анализ количества клеток

  1. CCA-I - определяет 1 флюоресцирующую метку
  2. CCA-II - определяет 2 флюоресцирующие метки + время  

Сперма быка, гистограмма ДНК, измеренная с помощью Partec CCA

ДНК гистограмма общего белка EAT клеток

 

Научно-производственная фирма «VitaS»

   480057 Казахстан, г. Алматы, 

ул. Айманова, 193, офис 61,

тел./факс (3272) – 75-42-43, 75-07-74, 74-12-99 

E-mail: vitas@nursat.kz

Последние изменения : Thursday September 14, 2006 .